Testprinzip ImmunoCAP Spezifisches IgG

Die ImmunoCAP Technologie basiert auf einer extrem hohen Gesamtbindefähigkeit, die durch die hohe Bindungsfähigkeit der Cellulose in der festen Phase erreicht wird. Dies stellt unabhängig von der Antikörperaffinität die Bindung aller relevanten Antikörper sicher und gewährleistet eine geringe unspezifische Bindung.

Die feste Phase des ImmunoCAP besteht aus einem Cellulosederivat, das in einer Kapsel eingeschlossen ist. Das hydrophile, stark verzweigte Polymer bietet eine ideale Mikroumgebung für Allergene und bindet diese irreversibel, wobei deren native Struktur aufrecht erhalten wird.

Bei dem Test handelt es sich um einen Sandwich-ELISA.

 
Das zu untersuchende Antigen, kovalent gebunden an die feste Phase, reagiert mit den spezifischen IgG-Antikörpern in der Patientenprobe.
Nachdem die unspezifischen IgG-Antikörper abgewaschen wurden, werden Enzym-markierte Antikörper gegen IgG hinzugefügt, die einen Komplex bilden.
Nach der Inkubation wird ungebundenes Enzym-Anti-IgG abgewaschen und der gebundene Komplex wird mit einem Entwicklerreagenz inkubiert.
Nach Abstoppen der Reaktion wird die Fluoreszenz des Eluats gemessen. Je höher die Fluoreszenz, umso mehr spezifische IgG-Antikörper sind in der Probe vorhanden.