Principio de la prueba VarelisA

La prueba VarelisA es un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA, enzyme linked immuno sorbent assay en inglés) y está diseñado como inmunoensayo de tipo sándwich.

Se recubre un pocillo con el antígeno reconocido por el anticuerpo diana que es específico para una enfermedad autoinmune determinada. Si el anticuerpo específico está presente en la muestra de sangre del paciente, se unirá al antígeno. En el siguiente paso de la reacción, un anticuerpo secundario conjugado a una enzima se une al anticuerpo diana. El sustrato se transforma en una reacción de tinción debido a la enzima. Mediante la comparación de la intensidad de la tinción generada por la muestra de la prueba con la de los estándares de concentraciones conocidas, se puede determinar la concentración de anticuerpos de la muestra de la prueba.

 
El antígeno de interés, cubierto hasta la fase sólida, une los anticuerpos específicos (p. ej., de tipo IgG) en la muestra del paciente.
Después de eliminar los anticuerpos no específicos no unidos, los anticuerpos marcados con enzimas contra el anticuerpo diana (p. ej., de tipo IgG) se añaden para formar un complejo.
Después de la incubación, se eliminan los anticuerpos marcados con enzimas no unidos y el complejo de unión se incuba con un sustrato de enzimas.
El sustrato se transforma en un producto de tinción debido a la enzima. Después de detener esta reacción, se mide la intensidad del color de la muestra. Cuanto más elevada sea la intensidad del color, más anticuerpos específicos (p. ej., del tipo IgG) habrá en la muestra.