Principio dell'esame EliA

L'esame EliA è un immunodosaggio d'enzima fluorescente (fluorescence enzyme immunoassay, FEIA) ed è progettato sotto forma di immunodosaggio "sandwich".

Un well viene rivestito con un antigene specificamente riconosciuto dagli anticorpi bersaglio, che rappresentano i marcatori per una determinata malattia autoimmune. Se questi specifici anticorpi sono presenti nel campione ematico del paziente, si legheranno all'antigene. Nella successiva fase di reazione, un anticorpo secondario coniugato all'enzima si lega all'anticorpo bersaglio, legato all'antigene.

L'enzima trasforma un substrato aggiunto in un prodotto fluorescente. Confrontando il segnale della fluorescenza con quello di calibratori di concentrazioni note, può essere determinata la concentrazione anticorpale nel campione dell'esame.

 
L'antigene interessato, rivestito sulla fase solida, si lega agli anticorpi specifici (ad esempio di classe IgG) nel campione del paziente.
Dopo la rimozione mediante lavaggio degli anticorpi non specifici non legati, vengono aggiunti anticorpi etichettati con enzimi contro l'anticorpo bersaglio (ad esempio di classe IgG) per formare un complesso.
Dopo l'incubazione, gli anticorpi etichettati con enzimi non legati vengono rimossi mediante lavaggio e il complesso legato viene quindi incubato con un agente di sviluppo.
Dopo il blocco della reazione, viene misurata la fluorescenza dell'eluato. Ad una maggiore fluorescenza corrisponde un quantitativo maggiore di anticorpi specifici (ad esempio di classe IgG) nel campione.