Princípio de Teste IgE Total ImmunoCAP

A tecnologia baseia-se numa capacidade de ligação total extremamente elevada, conseguida através de uma elevada capacidade de ligação por mg de celulose em associação com uma quantidade optimizada de celulose em cada fase sólida. Assim é assegurada a ligação de todos os anticorpos relevantes, independentemente da afinidade dos anticorpos, ainda com ligação não específica baixa.

A fase sólida do ImmunoCAP consiste num derivado de celulose fechado numa cápsula. O polímero hidrófilo muito ramificado oferece um micro-ambiente ideal para alergénios, ligando-os de forma irreversível enquanto mantém a respectiva estrutura nativa.

O teste é concebido como imunoensaio em sanduíche.

 
O Anti-IgE, acoplado por ligação covalente à fase sólida, reage com a IgE total na amostra de soro do doente.
Após lavagem, são adicionados anticorpos anti-IgE marcados por uma enzima para formarem um complexo.
Após incubação, o anti-IgE não ligado marcado por uma enzima é lavado e o complexo ligado é incubado com o substrato.
Após paragem da reacção, mede-se a fluorescência do eluído. A fluorescência é directamente proporcional à concentração de IgE na amostra de soro.