Princípio do teste VarelisA

O teste VarelisA é um ensaio de imunoabsorção enzimática (ELISA) concebido como imunoensaio em sanduíche.

Um poço é revestido com o antigénio reconhecido pelo anticorpo alvo, que é específico de uma doença auto-imune em particular. Se este anticorpo específico estiver presente na amostra de sangue do doente, ligar-se-á ao antigénio. No passo seguinte da reacção, um anticorpo secundário conjugado com enzima liga-se ao anticorpo alvo. Por causa da enzima, o substrato é transformado numa substância colorida. A comparação da intensidade de cor gerada pela amostra do ensaio com a de concentrações normais conhecidas permite determinar a concentração de anticorpos na amostra do ensaio.

 
O antigénio de interesse, revestido na fase sólida, liga-se aos anticorpos (por ex. da classe IgG) específicos na amostra do doente.
Após a lavagem de anticorpos não específicos e não ligados, são adicionados anticorpos marcados por uma enzima contra o anticorpo (por ex. da classe IgG) alvo para formarem um complexo.
Após a incubação, os anticorpos não ligados marcados por uma enzima são lavados e o complexo ligado é incubado com um substrato de enzima.
Por causa da enzima, o substrato é transformado num produto colorido. Após paragem desta reacção, mede-se a intensidade da cor da amostra. A intensidade da cor é directamente proporcional à presença de anticorpos (por ex. da classe IgG) específicos na amostra.